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Sommaire

  • 1Finalité du développement préclinique
  • 2Pharmacologie préclinique
    • 2.1Pharmacologie primaire
    • 2.2Pharmacologie secondaire et pharmacologie de sécurité
    • 2.3Exposition et devenir de la substance
  • 3Évaluation toxicologique
    • 3.1Toxicité générale
    • 3.2Toxicités particulières
    • 3.3Qualité et éthique des études lock — section verrouillée
  • 4Seuils toxicologiques et marge de sécurité lock — section verrouillée
  • 5Détermination de la première dose chez l'être humain lock — section verrouillée
    • 5.1Approche fondée sur la DSENO lock — section verrouillée
    • 5.2Approche fondée sur l'effet biologique minimal anticipé lock — section verrouillée
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B11 · Conception et développement

Développement préclinique : pharmacologie et toxicologie

Présenter les études précliniques in vitro et in vivo et les informations qu'elles apportent avant l'administration à l'homme. Décrire l'évaluation de la toxicité et la détermination de la première dose.

Médicament et produits de santé·schedule8 min de lecture·quiz17 QCM corrigés

Finalité du développement préclinique

Définition

Développement préclinique

Ensemble des études réalisées avant la première administration à l'être humain afin de caractériser les effets pharmacologiques, le devenir de la substance dans l'organisme et ses risques toxiques.

Le développement préclinique transforme une substance active potentielle en un candidat suffisamment documenté pour envisager une étude chez l'être humain. Il doit répondre à trois questions principales :

  • la substance produit-elle l'effet biologique recherché selon un mécanisme cohérent ?
  • quelles concentrations et quelles expositions sont nécessaires pour obtenir cet effet ?
  • à partir de quelles doses apparaissent des effets indésirables, dans quels organes et avec quelle réversibilité ?

Ces réponses reposent sur des études in vitro, effectuées sur des systèmes biologiques isolés, et in vivo, conduites sur un organisme entier. Les résultats précliniques ne prouvent ni l'efficacité clinique ni l'absence de toxicité chez l'être humain. Ils réduisent l'incertitude et permettent de construire une première administration aussi prudente que possible.

Comparaison

Études in vitro et in vivo

CritèreÉtudes in vitroÉtudes in vivo
Système étudiémolécules, cellules ou tissus isolésorganisme entier
Information principalemécanisme, puissance et toxicité cellulaireeffet intégré, exposition et toxicité d'organe
Contrôle expérimentalélevé, avec peu de variablesplus faible en raison des interactions physiologiques
Limite majeureabsence d'intégration à l'échelle de l'organismedifférences entre espèces et variabilité biologique

Pharmacologie préclinique

Pharmacologie primaire

Définition

Pharmacologie primaire

Étude des effets du candidat médicament directement liés à la cible et au mécanisme thérapeutique recherchés.

Les essais in vitro déterminent si la substance interagit réellement avec sa cible. Ils caractérisent son affinité, sa puissance, son efficacité maximale et la relation entre sa concentration et l'intensité de l'effet. Ils évaluent également sa sélectivité vis-à-vis de cibles moléculaires proches.

Les études in vivo recherchent ensuite si cet effet persiste dans un organisme entier. Elles relient la dose administrée, l'exposition obtenue et la réponse biologique. Elles permettent ainsi d'établir une relation pharmacocinétique-pharmacodynamique : la pharmacocinétique décrit ce que l'organisme fait à la substance, tandis que la pharmacodynamie décrit ce que la substance fait à l'organisme.

Pharmacologie secondaire et pharmacologie de sécurité

Définition

Pharmacologie secondaire

Étude des effets pharmacologiques qui ne résultent pas du mécanisme thérapeutique principal, notamment ceux produits par l'interaction avec des cibles non recherchées.

La recherche d'activités hors cible permet d'anticiper certains effets indésirables. Elle associe des essais de liaison à différentes cibles, des mesures fonctionnelles cellulaires et, lorsque cela est nécessaire, des études intégrées.

Définition

Pharmacologie de sécurité

Étude des effets indésirables potentiels d'une substance sur les fonctions physiologiques vitales, particulièrement les fonctions cardiovasculaires, respiratoires et neurologiques.

La pharmacologie de sécurité se distingue de la toxicologie générale par son orientation fonctionnelle. Elle recherche notamment des modifications immédiates de l'activité électrique cardiaque, de la pression artérielle, de la ventilation, du comportement ou de l’activité motrice.

Exposition et devenir de la substance

Les études précliniques caractérisent l'absorption, la distribution, le métabolisme et l'élimination de la substance. Leur présentation détaillée relève de la fiche consacrée à la pharmacocinétique ; ici, elles servent surtout à interpréter les effets observés.

La dose administrée n'est pas à elle seule un indicateur suffisant. Il faut connaître l'exposition systémique, décrite notamment par :

  • la concentration maximale, notée Cmax⁡C_{\max}Cmax​ ;
  • l'aire sous la courbe des concentrations en fonction du temps, notée ASC ;
  • la durée pendant laquelle les tissus sont exposés ;
  • la présence éventuelle de métabolites actifs ou toxiques.

Une absence de toxicité n'est informative que si l'exposition obtenue est connue et suffisante.

Évaluation toxicologique

Définition

Danger toxique

Propriété intrinsèque d'une substance capable de provoquer un effet nocif.

Définition

Risque toxique

Probabilité qu'un effet nocif survienne dans des conditions déterminées d'exposition.

Une substance peut donc présenter un danger sans entraîner le même niveau de risque à toutes les doses. L'évaluation toxicologique établit la relation entre la dose, l'exposition, la durée de traitement et les lésions observées.

Toxicité générale

Les études de toxicité à dose unique décrivent les effets suivant une administration isolée. Les études à doses répétées recherchent les conséquences d'une exposition prolongée et sont conçues en cohérence avec la durée et la voie d'administration envisagées chez l'être humain.

Elles évaluent :

  • les signes cliniques et les fonctions physiologiques ;
  • les paramètres sanguins et biochimiques ;
  • les modifications de masse des organes ;
  • les lésions macroscopiques et microscopiques ;
  • les organes cibles de la toxicité ;
  • la persistance ou la réversibilité des effets après l'arrêt de l'exposition.

La toxicocinétique mesure les concentrations de la substance au cours de ces études. Elle vérifie que l'exposition augmente avec la dose et relie les lésions observées à l'exposition réellement atteinte.

Toxicités particulières

L'évaluation est complétée selon la nature du produit, la population visée et la durée prévue d'utilisation :

  • la génotoxicité recherche une atteinte de l'ADN ou des chromosomes ;
  • la toxicité sur la reproduction et le développement étudie la fertilité, le développement embryonnaire et fœtal ainsi que le développement après la naissance ;
  • la cancérogénicité recherche la capacité à favoriser l'apparition de tumeurs lors d'expositions prolongées ;
  • la tolérance locale étudie les lésions au site d'administration ;
  • l'immunotoxicité recherche une altération ou une activation indésirable du système immunitaire.

Toutes ces études ne sont pas nécessairement achevées avant la première administration humaine. Leur calendrier dépend de la durée de l'essai clinique, de la population incluse et du risque propre au produit.

Qualité et éthique des études

Les études toxicologiques réglementaires sont conduites selon les bonnes pratiques de laboratoire, qui imposent des procédures documentées, une traçabilité des données, un contrôle de qualité et l'archivage des résultats.

L'utilisation d'animaux suit le principe des trois R :

  1. Remplacer l'animal lorsque des méthodes non animales permettent d'obtenir l'information requise.
  2. Réduire le nombre d'animaux au minimum compatible avec une conclusion fiable.
  3. Raffiner les procédures afin de limiter la douleur, la détresse et les atteintes durables.
À retenir

La pertinence d'une étude préclinique dépend moins de la dose administrée que de l'exposition obtenue, de la durée d'exposition et de la possibilité de relier cette exposition aux effets observés.

Seuils toxicologiques et marge de sécurité

Définition

Dose sans effet indésirable observé, DSENO

Dose la plus élevée testée pour laquelle aucun effet indésirable attribuable au produit n'est observé dans les conditions de l'étude. Elle est aussi désignée par l'acronyme réglementaire NOAEL.

Définition

Dose minimale avec effet indésirable observé

Dose la plus faible testée à partir de laquelle apparaît un effet indésirable attribuable au produit.

La DSENO n'est pas une limite absolue entre innocuité et toxicité. Elle dépend des doses choisies, de la sensibilité des méthodes, de l'espèce, de la durée d'étude et des critères retenus pour qualifier un effet d'indésirable.

La marge de sécurité compare l'exposition associée à la toxicité chez l'animal à l'exposition prévue chez l'être humain. Une comparaison fondée sur l'ASC ou sur Cmax⁡C_{\max}Cmax​ est souvent plus pertinente qu'une simple comparaison en masse de substance par kilogramme.

Exemple

Calculer une marge de sécurité à partir de l’ASC

Dans une étude animale, des effets indésirables sont observés à partir d’une ASC de 120 mg h / L\pu{120 mg h/L}120 mgh/L. Pour la première administration chez l’être humain, l’ASC prévue à la dose proposée est de 20 mg h / L\pu{20 mg h/L}20 mgh/L.

  • Exposition associée à la toxicité chez l’animal : 120 mg h / L\pu{120 mg h/L}120 mgh/L
  • Exposition prévue chez l’être humain : 20 mg h / L\pu{20 mg h/L}20 mgh/L
  • Marge de sécurité fondée sur l’ASC : 12020=6\frac{120}{20} = 620120​=6

La marge de sécurité est de 666, sans unité. L’exposition prévue chez l’être humain est donc six fois plus faible que l’exposition associée aux effets indésirables observés chez l’animal. Cette valeur doit ensuite être interprétée avec les autres données de toxicité et les incertitudes de transposition.

Attention

Ne pas confondre absence d'effet observé et absence de danger

Aucun effet détecté à une dose donnée ne signifie pas que la substance est dépourvue de toxicité. Un effet rare, tardif, spécifique de l'être humain ou non recherché par le protocole peut ne pas être observé.

Détermination de la première dose chez l'être humain

La première dose doit être assez faible pour limiter le risque, tout en permettant une progression rationnelle de l'étude. Sa détermination associe les résultats toxicologiques, les données pharmacologiques, l'exposition prévue et les incertitudes de transposition entre espèces.

Approche fondée sur la DSENO

La DSENO obtenue dans l'espèce pertinente est convertie en dose équivalente humaine. Cette conversion tient compte des différences de taille corporelle, de métabolisme ou d'exposition. Un facteur de sécurité est ensuite appliqué.

Exemple

Déterminer une première dose à partir de la DSENO

Chez l’animal, la DSENO est de 10 mg/kg\pu{10 mg/kg}10 mg/kg. Le coefficient de conversion retenu pour obtenir la dose équivalente humaine est de 0,160{,}160,16. Un facteur de sécurité de 101010 est appliqué.

  • Dose équivalente humaine : DEH=10×0,16=1 ,6 mg / kgD_{\mathrm{EH}} = 10 \times 0{,}16 = \pu{1{,}6 mg/kg}DEH​=10×0,16=1 ,6mg/kg
  • Première dose proposée : Ddeˊpart=1,610=0 ,16 mg / kgD_{\text{départ}} = \frac{1{,}6}{10} = \pu{0{,}16 mg/kg}Ddeˊpart​=101,6​=0 ,16mg/kg

La première dose proposée est de 0 ,16 mg / kg\pu{0{,}16 mg/kg}0 ,16mg/kg. Elle est dix fois inférieure à la dose équivalente humaine calculée à partir de la DSENO, afin de tenir compte des incertitudes avant la première administration chez l’être humain.

Formule

Principe de calcul de la dose initiale

DEH=DDSENO×CDdeˊpart=DEHFsD_{\mathrm{EH}} = D_{\mathrm{DSENO}} \times C \qquad D_{\text{départ}} = \frac{D_{\mathrm{EH}}}{F_{\mathrm{s}}}DEH​=DDSENO​×CDdeˊpart​=Fs​DEH​​
  • DEHD_{\mathrm{EH}}DEH​ : dose équivalente humaine
  • DDSENOD_{\mathrm{DSENO}}DDSENO​ : dose sans effet indésirable observé chez l'animal
  • CCC : coefficient de conversion entre l'animal et l'être humain
  • DdeˊpartD_{\text{départ}}Ddeˊpart​ : première dose proposée chez l'être humain
  • FsF_{\mathrm{s}}Fs​ : facteur de sécurité, sans unité

Le facteur de sécurité augmente lorsque persistent des incertitudes concernant la gravité ou l'irréversibilité des lésions, la pente de la relation dose-effet, la variabilité entre espèces, la présence de métabolites particuliers ou la qualité des données disponibles.

Approche fondée sur l'effet biologique minimal anticipé

Définition

Niveau minimal d'effet biologique anticipé

Exposition ou dose minimale susceptible de produire un effet biologique chez l'être humain, estimée à partir de la puissance pharmacologique, de l’occupation de la cible et des données disponibles.

Cette approche est particulièrement importante lorsqu'une faible occupation de la cible peut déclencher une réponse intense ou durable. Elle tient compte des données in vitro humaines, de la relation concentration-effet, de l'affinité pour la cible et des prévisions pharmacocinétiques.

Méthode

Justifier une première dose

  1. Identifier les espèces et systèmes biologiques pertinents pour l'être humain.
  2. Déterminer la DSENO et les expositions associées dans les études toxicologiques.
  3. Établir une dose équivalente humaine par une méthode de conversion justifiée.
  4. Estimer le niveau minimal d'effet biologique anticipé à partir de la pharmacologie.
  5. Appliquer un facteur de sécurité adapté aux incertitudes et à la gravité des risques.
  6. Retenir une dose initiale prudente et définir les paramètres de surveillance.
À retenir

Choix de la dose initiale

La première dose humaine ne correspond ni à la dose efficace attendue ni à la DSENO animale. Elle résulte d'une intégration prudente des seuils toxicologiques, de l'effet biologique anticipé, de l'exposition et des facteurs d'incertitude.

L'organisation de l'administration, la surveillance des participants et l'augmentation ultérieure des doses relèvent de la méthodologie des essais cliniques.

Points clés
  • Les études in vitro caractérisent le mécanisme, la puissance, la sélectivité et la toxicité cellulaire du candidat.
  • Les études in vivo évaluent l'effet intégré, l'exposition systémique, les organes cibles et la réversibilité des effets toxiques.
  • La DSENO est la plus forte dose testée sans effet indésirable observé, mais elle ne garantit pas une absence de danger.
  • La toxicocinétique relie les concentrations réellement atteintes aux effets pharmacologiques et toxiques.
  • La première dose humaine combine conversion de la DSENO, estimation de l'effet biologique minimal et facteur de sécurité.
  • Les données précliniques réduisent l'incertitude sans supprimer les différences entre l'animal et l'être humain.

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